2.3高压制备方法的高压确定 初始方法为鲁南新时代生物技术有限公司在50mm高压制备液相(汉邦科技,制备型液相色谱系统,制备中试NS4000)上开发,纽莫是康定以二氯甲烷、甲醇和水体系制备纽莫康定B0,研究国内外未见具体报道。高压张宇等采用了氯仿、制备中试甲醇和水体系,纽莫笔者以二氯甲烷进行实验,康定毒性低于氯仿,研究价格也低于氯仿,高压放大生产具有一定的制备中试优越性。初始方法:将纽莫康定B0粗品(质量分数为81.2%,纽莫HPLC检测如图1所示,康定纽莫康定B0的研究色谱纯度为88.58%、纽莫康定C0的色谱纯度为8.78%)用甲醇、二氯甲烷混合溶液(V(甲醇)∶V(二氯甲烷)=1∶4)溶解,波长276nm;柱温20~30℃;流量70mL/min;上样量1.7g;流动相,V(二氯甲烷(工业))∶V(甲醇)∶V(水)=43∶9∶1;操作压力5~5.5MPa。收集B0的HPLC色谱纯度>95%的制备液。纽莫康定B0的色谱纯度值和纽莫康定C0的色谱纯度值是经过面积归一化法得到的。以线性原则放大到中试150mm制备柱(Cs-prep150工业制备色谱系统,汉邦科技),流量调整为630mL/min;进样量15.3g;其他不变。在此基础上,对该方法进行了进一步优化。 2.3.1流动相比例的优化 根据正相色谱特点,通过调控二氯甲烷,对流动相比例进行优化。在初始方法中,实验分析了V(二氯甲烷(工业))∶V(甲醇)∶V(水)的5个比例对纽莫康定B0制备分离的影响,实验结果如表2所示。
2.3.2上样量的优化 上样量在色谱制备中影响着目的峰的分离度及制备效率。因此,在流动相比例确定为V(二氯甲烷(工业))∶V(甲醇)∶V(水)=42∶9∶1的基础上,实验选取了3种进样量(7.5,11.4,15.3g)对纽莫康定B0制备的效果进行研究,实验结果如表3所示。
式中:X为上样液对应粗品质量;Y为粗品B0质量分数。 由表3可知:上样量11.4g收率高于上样量7.5,15.3g。收率高,则在中试、大生产中预示着低成本、高效益,以及制药企业在市场中较高的竞争力。因此,综合考虑对纽莫康定B0的分离效果和收率,选择11.4g上样量。 2.3.3洗脱流速的优化 在高压制备液相色谱中,洗脱流速影响柱压、峰型,进而影响到制备效率及效果。故在确定流动相比例V(二氯甲烷(工业))∶V(甲醇)∶V(水)=42∶9∶1及上样量11.4g的基础上,考察了5个洗脱流速(480,530,580,630,680mL/min)对纽莫康定B0制备的影响,结果如表4所示。
随着流速的增加,柱压逐渐增加,而实验所用150mm高压制备系统工作压力为0~7MPa。随着进样次数的增加,柱压会逐渐增高,再生柱子会越频繁,如此会占用一定的工时和消耗再生溶剂,增加生产成本。另外,在5个流速下,冻干粉的收率和B0质量分数相差不大。综上考虑,优选480mL/min的流速作为150mm的制备柱流速。 2.4纽莫康定B0的高压色谱制备 以优化后的高压制备条件,在150mm制备柱上进行纽莫康定B0的制备。对B0峰分段收集,连续进样,合并纽莫康定B0的HPLC色谱纯度大于95%的制备液。将合并液进行减压浓缩,冻干,得到纽莫康定B0冻干粉。 声明:本文所用图片、文字来源《发酵科技》,版权归原作者所有。如涉及作品内容、版权等问题,请与本网联系删除 相关链接:二氯甲烷,氯仿,纽莫康定 |
电子雾化玻璃成为装修业界的新宠,行业资讯辽宁大连较早的农村家庭光伏发电站建成,行业资讯大力发展光伏产业的同时 更要健康发展,行业资讯如何提高怀孕几率,快速迎接新生命的到来中国环境空气苯系物类挥发性有机物监测能力现状分析(三)广西崇左:“固定党日+”助推民营企业高质量发展茉莉花双纹须歧角螟性诱监测材料筛选及田间应用效果评价(三)HPLC法同时测定医用橡胶中4种添加剂(一)MM6 Maison Margiela x Salomon全新联名鞋款XT酒泉瓜州200贫困户受益光伏扶贫项目,行业资讯湖北武汉开展电梯安全应急演练浙江衢州市场监管局提醒:警惕消失的黄金玻璃容器的工艺生产流程 玻璃瓶的使用特点和种类,行业资讯磨砂玻璃拥有着什么特性 磨砂玻璃都有哪些优缺点,行业资讯玻璃推拉门怎么做更好看 玻璃移门日常保养的方法,行业资讯玻璃要经过哪些加工手段 玻璃原片的功能尺寸特点,行业资讯玻璃震荡走低 空单谨慎带有,行业资讯为什么日本人不吃林卡尔?介绍日本人对林卡尔的方法分析浙江省绍兴市上虞区开展开学季眼镜质量专项检查行动广东开展校园食品“你点我检、服务惠民生”活动制造彩绘玻璃的工艺流程 强化玻璃彩膜好用吗,行业资讯黑龙江牡丹江:专项整治肉制品市场DESCENTE迪桑特乙巳蛇年限定系列荣耀登场玻璃印花设备有什么特点 玻璃丝印有哪些必要组件,行业资讯2019年2月18日中国玻璃综合指数,行业资讯浙江湖州:“三个提前”助推医疗器械产业创新发展Chanel香奈儿庆祝高级刺绣工坊Lesage百年庆典沈阳:药品安全宣走进基层发布违法广告 四川淘联网络公司被罚6万元福建龙岩:多举措强化月饼市场价格和过度包装监管玻璃幕墙的安装施工方案 结构式玻璃幕墙制造工艺,行业资讯厂家烘托气氛,增加出库为主!,行业资讯玻璃隔断通常要怎么安装 玻璃门的种类与相互区别,行业资讯江西省市场监管局发布消费提示:补充电解质要讲科学鱼缸用哪种玻璃材料做的 做玻璃鱼缸应该用什么胶,行业资讯区域厂家调价,总体出库平平!,行业资讯《天津市支持个体工商户转企发展若干措施》出台福建厦门首台合规自动售械机现身医院银行防弹玻璃的安装规范 防弹玻璃是怎么固定的,行业资讯光致变色玻璃的工作原理 玻璃隔断种类及特点简介,行业资讯