2.5 FS ext对ACh和KCl诱导的连翘离体家兔离体空肠收缩的松弛作用
FS ext能浓度依赖性地抑制由ACh诱导的肠管收缩,EC50=0.99 mg/ml(0.91~1.02 mg/ml,叶乙n=6),最大抑制率为84.75%,醇提其量-效关系曲线变化见图5A。取物其对此外,抗小空肠FS ext也能够以浓度依赖的鼠蓖收缩方式抑制由KCl诱导的肠管收缩,EC50=0.63 mg/ml(0.58~0.67 mg/ml,麻油n=6),最大抑制率为91.45%,性腹泻活性及响研其量-效关系曲线变化见图5A。家兔肌自究FS ext对ACh和KCl诱导的平滑家兔离体空肠平滑肌收缩的松弛作用与维拉帕米在0.001~3.000μmol/L时相似,EC50值分别为0.25μmol/L(0.20~0.29μmol/L,发性n=6)和0.041μmol/L(0.033~0.047μmol/L,n=6),其量-效关系曲线变化见图5B。连翘离体
2.6 FS ext对CaCl2诱导的叶乙空肠收缩的影响
FS ext以浓度依赖的方式抑制CaCl2诱导的肠管收缩,最大抑制率为52.13%,醇提进一步研究发现,取物其对随着FS ext剂量的增加,形成的CaCl2量-效关系曲线向右下方移动,这与维拉帕米引起的CaCl2量-效关系曲线变化类似,见图6。
3 讨论
在蓖麻油诱导的小鼠急性腹泻模型中,蓖麻油通过刺激小肠,损伤小肠黏膜细胞,促进炎性递质合成和释放,导致肠腔内积液而出现急性腹泻;此外,蓖麻油能减少Na+和K+主动吸收,降低小肠和结肠Na+-K+ATP酶活性。蓖麻油中含有的蓖麻油酸能够引起局部刺激和肠黏膜炎症,从而导致前列腺素释放,增强胃肠动力。蓖麻油诱导小鼠腹泻实验中,试验组与阴性组相比,小鼠EI明显降低,初始半固体粪便时间延长。根据植物化学分析,FS ext中含有黄酮类化合物。因为萜烯、黄酮类化合物和萜类化合物可以抑制自体蛋白和前列腺素的释放,所以根据实验结果推测,FS ext中可能含有抑制前列腺素释放的物质,从而抑制小鼠蓖麻油性腹泻。
通过探究FS ext对家兔离体空肠平滑肌自发性收缩的影响,发现其表现出一定的剂量依赖性解痉作用,进一步印证FS ext可以抑制蓖麻油诱导的小鼠腹泻。ACh是肠神经系统中主要的兴奋性神经递质,可通过激活毒蕈碱受体(M受体)诱导平滑肌自发性收缩。肠神经系统的副神经系统和内在神经元通过释放ACh、激动肠平滑肌细胞膜上的M受体而增加其收缩活性,促进肠道蠕动。在FS ext对ACh诱导的家兔离体空肠平滑肌自发性收缩影响实验中,FS ext试验组空肠收缩变化率呈下降趋势,与维拉帕米组的实验结果一致,提示FS ext能够舒张ACh诱导的离体空肠平滑肌自发性收缩,因此FS ext舒张肠平滑肌的作用可能与阻断M受体有关。平滑肌的收缩取决于细胞质中Ca2+的存在,细胞外的Ca2+通过细胞表面的L-型钙离子通道进入细胞内,或是通过细胞内肌浆网释放Ca2+,从而使得细胞内Ca2+升高。
因此,钙通道的阻断或是细胞内储存的Ca2+释放量减少均会减弱平滑肌的收缩。在细胞兴奋过程中,L-型钙离子通道可调节细胞内Ca2+浓度保持在参考范围,即钙稳态的主要离子通道。由之前的文献可知,高浓度的K+水平可打开电压依赖性L-型钙离子通道并允许细胞外Ca2+进入细胞内,从而促进肠平滑肌的收缩。FS ext可松弛高K+诱导的肠平滑肌自发性收缩,提示可能有钙拮抗剂的存在。因此,为验证这一猜想,本实验使用KCl溶液诱导肠管收缩,并将维拉帕米作为对照组,维拉帕米是一种L-型钙离子通道阻断剂。实验结果显示,FS ext能松弛KCl诱导的家兔离体空肠平滑肌自发性收缩,且随着FS ext浓度的增加,形成的CaCl2量-效关系曲线向右下方移动,这与维拉帕米引起的CaCl2量-效关系曲线变化类似。提示FS ext抑制家兔离体空肠平滑肌的收缩可能与阻断L-型钙离子通道有关。
综上,FS ext有明显的抗小鼠蓖麻油性腹泻作用,可抑制家兔离体空肠平滑肌的自发性收缩和ACh和KCl诱导的空肠收缩,其机制可能与阻断M受体和抑制L型-钙离子通道有关。
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